特殊染色

病理组织切片染色技术作为病理实验室基本方法之一，具有较高的使用价值，也是目前临床外科病理最基本、最常见的形态学检验技术。组织切片染色就是利用染料在组织切片上给予不同颜色，使其与组织或者细胞内的某种成分发生作用，经过透明后通过光谱吸收和折射，使其各种微细结构能显现不同颜色，这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。

下面主要介绍天斯睿特殊染色中的Masson染色、油红0染色、天狼星红染色以及普鲁士蓝染色。

（一）Masson染色用两种或三种阴离子染料混合，原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。

1、石蜡切片脱蜡至水.
2、铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略).
3、依次自来水和蒸馏水洗.
4、用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min.
5、充分水洗,如过染可盐酸酒精分化.
6、蒸馏水洗.
7、用Masson丽春红酸性复红液5-10min.
8、以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻.
9、1%磷钼酸水溶液分化3-5min.
10、不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min.
11、以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻.
12、95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固.

（二）油红0染色油红O染色是用于观察脂质含量的常用方法。油红O属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类，它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置入染液时，染料则离开染液而溶于组织内的脂质/脂滴中，使组织内的脂滴呈橘红色。

1、样本固定加10%中性甲醛固定30min，固定细胞膜；
2、加入油红工作液，染色10min左右，加的体积覆盖住板底即可；
3、脱色，用75%酒精漂洗，除去多余的染料；
4、甘油明胶封片(封片后可长期保存)；
5、显微镜观察

（三）天狼星红染色天狼星红主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。

1、制备石蜡切片；
2、切片脱蜡至水；
3、染色；
4、脱水，透明，封固；
5、偏振光显微镜下观察染色结果。

（四）普鲁士蓝染色组织样本中的铁在酸性环境下，与亚铁化钾作用，形成普鲁士蓝反应，产生蓝色的亚铁化钾沉淀，从而定位于含铁的部位，反映铁的含量，常用于定位样本中的铁含量。

1、脱蜡，水化；
2、切片入普鲁士蓝染液，浸染15～30min；
3、蒸馏水充分冲洗5～10min；
4、入1%伊红染色液，淡染细胞核15～30s；
5、蒸馏水冲洗1～5s；
6、常规脱水透明，中性树胶封固

1、新鲜或正确保存的样品（按照我们的要求提供）
2、阳性对照样品（尽量提供）
3、相关文献（可选）

1、客户提供的实验样本
2、实验原始数据
3、完整实验报告