细胞周期
细胞周期是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程,它反映了细胞增殖的速度。一个完整的细胞周期包含间期和分裂期(M期)两个阶段,间期又分为DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)和DNA合成后期(G2期),处于不同时期的细胞的DNA含量存在差异。
一般认为,G1期细胞具有增殖活性,参与细胞周期循环,是二倍体细胞;S期细胞,DNA含量逐渐增加,从二倍体变成四倍体,随后进入G2期,最终进入M期。检测细胞周期常用的方法是检测DNA含量,可以选择能与DNA结合的荧光染料(如PI),再根据细胞各个时期DNA含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的细胞比例。
G2期的细胞继续合成RNA及蛋白质,直到进入M期。因此,单纯从DNA含量无法区分G2期和M期。一旦有丝分裂发生,细胞分裂成两个细胞,这两个细胞或者进入下一个细胞周期,或者进入静止期(G0期),而G0期从DNA含量上同样无法与G1期区分。因此,整个复制周期可以描述为G0/G1、S、G2/M期。
碘化丙啶(PI)DNA染色法
除了基础细胞学研究,FCM的DNA测定在肿瘤早期诊断和鉴别诊断中有很重要的作用,尤其对于早期缺乏客观明确指标的肿瘤,流式细胞术分辨率高、精准,可以提供客观而准确的资料。
1、分析后的结果图;
2、原始数据(FCS文件)。
1、客户提供实验样本(单细胞悬液),书面告知样本详细信息、实验方案和检测要求。2、单细胞悬液内的细胞状态应当符合实验目的且无污染,细胞数量原则上应当≥1×10⁶。
3、客户如提供人外周全血或小鼠全血样本,需要代为分离单个核细胞或者裂解红细胞的,分离PBMC每管血100元,裂解红细胞每管血50元。
4、不接收有致病性或传染风险的样本。
5、样本数量是根据实验设计的上机样本管数,不一定是客户提供的初始样品数目,必要的对照管参照样本管收费。
6、现阶段需客户自行送样,样本一律避光低温运输,建议将样品置于EP管运输,客户提供的试剂按照各具体保存条件运输。实验室原则上不保存实验后剩余样本,如有相关需求,请在实验开始之前书面说明。剩余的客户提供的试剂在实验结束后返还。
7、基于细胞样本的特殊性,送样时间仅限工作日,未固定细胞原则上应当在14:00之前送达,已固定良好的样本可在17:00之前送达。
实验室接收样本之日起二至四个工作日以内;
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