流式技术服务

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一、实验原理

流式细胞术(flowcytometry,FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项快速、精准的对单个细胞理化特征进行多参数定量分析的技术。结合了荧光抗体的单细胞悬液在仪器内形成稳定的单细胞液柱,在激光照射下产生特异性荧光,同时根据细胞大小和胞内颗粒多少产生不同强度散射光。系统将收集到的光信号进行数据转换和分析,并以图像和数据显示,包括直方图、散点图、阳性细胞百分比、平均荧光强度等多参数资料。

 

 

二、服务优势

1、实验室建立了成熟的细胞表面蛋白标记检测、细胞因子检测、细胞凋亡及周期检测等技术方法。

2、可承接免疫功能评价、免疫保护与致病机制相关课题的支撑等技术服务。

3、流式细胞仪配备二激光六通道,激光波长为488nm和633nm,可检测FITC、PE、PerCP-Cy5.5、PE-Cy7、APC和APC-Cy7及同等通道的荧光。

 

三、实验应用

免疫学、肿瘤学、细胞学、神经学、血液学等

 

四、报告内容

1、分析后的结果图;

2、原始数据(FCS文件)。

 

五、样本说明

1、客户提供实验样本(单细胞悬液)书面告知样本详细信息、实验方案和检测要求。其中,样本信息至少应当包括细胞种属及来源、重悬缓冲液、标记抗体、样本管标记说明等,例如,人PBMC,Permbuffer重悬,CD3-FITC,IFNg-PE,样本管上unsti代表未刺激,con代表对照组,a管的抗体有CD3,b管的抗体有CD3和IFNg。

2、单细胞悬液内的细胞状态应当符合实验目的且无污染,细胞数量原则上应当≥1×10⁶

3、客户如提供人外周全血或小鼠全血样本,需要代为分离单个核细胞或者裂解红细胞的,分离PBMC每管血100元,裂解红细胞每管血50

4、不接收有致病性或传染风险的样本。

5、除了检测样本,客户按需提供荧光抗体、商品化固定破膜试剂、同型对照抗体、死活染料、Fc阻断剂、补偿微球等。实验室可免费提供试管、PBS、染色缓冲液、多聚甲醛、实验中必要的少量1640培养基。如客户提供的抗体等试剂为自行分装的,还须提供试剂的品牌、货号以及有效期。

6、样本数量是根据实验设计的上机样本管数,不一定是客户提供的初始样品数目,必要的对照管参照样本管收费

7、现阶段需客户自行送样,样本一律避光低温运输,建议将样品置于EP管运输,客户提供的试剂按照各具体保存条件运输。实验室原则上不保存实验后剩余样本,如有相关需求,请在实验开始之前书面说明。剩余的客户提供的试剂在实验结束后返还。

8、基于细胞样本的特殊性,送样时间仅限工作日,未固定细胞原则上应当在14:00之前送达,已固定良好的样本可在17:00之前送达。

9、荧光素选择建议:检测指标优先使用标记FITC、PE、APC、PerCP-Cy5.5的抗体,死活染料优先使用APC-Cy7通道(如eFluor780)。

 

六、服务周期

实验室接收样本之日起二至四个工作日以内;

 

七、项目内容

2022年4月28日 14:50
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